Εφαρμογή Ανάλυσης HPLC σε Περιστροφικό Εξατμιστήρα

Η υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης (HPLC) ονομάζεται επίσης υγρή χρωματογραφία υψηλής πίεσης, υγρή χρωματογραφία υψηλής ταχύτητας, υγρή χρωματογραφία υψηλής ανάλυσης και σύγχρονη χρωματογραφία στήλης. Είναι μια αποτελεσματική και γρήγορη αναλυτική τεχνολογία διαχωρισμού που αναπτύχθηκε γρήγορα τη δεκαετία του 1970 και είναι ένα σημαντικό μέσο για τις σύγχρονες δοκιμές διαχωρισμού.

Η υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης (HPLC) χρησιμοποιεί υγρό ως κινητή φάση και υιοθετεί σύστημα έγχυσης υψηλής πίεσης για την άντληση της κινητής φάσης, όπως απλό διαλύτη με διαφορετικές πολικότητες ή μικτό διαλύτη και ρυθμιστικό διάλυμα με διαφορετικές αναλογίες στη χρωματογραφική στήλη με στατική φάση. Αφού διαχωριστούν τα εξαρτήματα της στήλης, μπαίνουν στον ανιχνευτή για ανίχνευση, ώστε να πραγματοποιηθεί η ανάλυση του δείγματος.

Ο μηχανισμός διαχωρισμού της υγρής χρωματογραφίας υψηλής απόδοσης είναι ο ίδιος με αυτόν της συμβατικής χρωματογραφίας στήλης, αλλά η συσκευασία είναι λεπτότερη και πρέπει να προωθηθεί από αντλία υψηλής πίεσης, η οποία έχει υψηλή απόδοση στήλης και γρήγορη ταχύτητα ανάλυσης. Διαφορετικά από την αέρια χρωματογραφία, η κινητή φάση στην υγρή χρωματογραφία συμμετέχει επίσης στη διαδικασία διαχωρισμού των συστατικών και η σύνθεση, η αναλογία και η τιμή του pH μπορούν να ρυθμιστούν ευέλικτα, με διάφορους τρόπους διαχωρισμού. Στην πράξη, η τιμή κατακράτησης και η επιλεκτικότητα των δειγμάτων στη χρωματογραφική στήλη προσαρμόζονται αλλάζοντας τη σύνθεση της κινητής φάσης, έτσι ώστε να μπορούν να διαχωριστούν διαφορετικά δείγματα.

 

Συστατικά ανάλυσης HPLC

 

Στήλη: Η στήλη είναι το βασικό συστατικό του συστήματος HPLC, το οποίο χρησιμοποιείται για τον διαχωρισμό των ενώσεων στο δείγμα. Οι κοινές στήλες διαχωρισμού περιλαμβάνουν στήλη αντίστροφης φάσης, στήλη ανταλλαγής ιόντων, στήλη διήθησης γέλης, κ.λπ., και η επιλογή τους εξαρτάται από τις ιδιότητες της ένωσης που πρόκειται να διαχωριστεί και τον σκοπό της ανάλυσης.

Κινητή φάση: Η κινητή φάση είναι ένας συνδυασμός διαλυτών που χρησιμοποιούνται στην HPLC για τη διέλευση ενός δείγματος μέσω μιας στήλης διαχωρισμού. Η κινητή φάση συνήθως αποτελείται από ένα μείγμα διαλυτών, το οποίο μπορεί να είναι ένας μόνος διαλύτης ή ένα μείγμα πολλαπλών διαλυτών σε μια ορισμένη αναλογία. Η επιλογή της κατάλληλης ροής είναι πολύ σημαντική για το αποτέλεσμα διαχωρισμού.

Αντλία: Η αντλία χρησιμοποιείται για την παροχή της κινητής φάσης και την ώθησή της μέσω της στήλης διαχωρισμού σε μια ορισμένη πίεση. Οι κοινές αντλίες περιλαμβάνουν αντλία σταθερής πίεσης και αντλία βαθμίδωσης. Η αντλία κλίσης μπορεί να πραγματοποιήσει γραμμική ή μη γραμμική αλλαγή της σύνθεσης κινητής φάσης, έτσι ώστε να επιτευχθεί καλύτερο αποτέλεσμα διαχωρισμού.

Εγχυνών: Ο εγχυτήρας χρησιμοποιείται για την εισαγωγή του προς ανάλυση δείγματος στο σύστημα HPLC. Ο δειγματολήπτης μπορεί να είναι μια χειροκίνητη σύριγγα ή ένας αυτόματος δειγματολήπτης. Συνήθως έχουν τα χαρακτηριστικά του ακριβούς όγκου και της καλής επαναληψιμότητας για την εξασφάλιση ακριβούς έγχυσης δείγματος.

Φούρνος στήλης: Ο φούρνος στήλης χρησιμοποιείται για τον έλεγχο της θερμοκρασίας της στήλης διαχωρισμού. Με τον έλεγχο της θερμοκρασίας, ο συντελεστής κατανομής και η ταχύτητα διαχωρισμού του δείγματος στη στήλη μπορούν να αλλάξουν, βελτιστοποιώντας έτσι το αποτέλεσμα διαχωρισμού.

Ανιχνευτής: Ο ανιχνευτής χρησιμοποιείται για την ανίχνευση της διαχωρισμένης ένωσης και τη δημιουργία ηλεκτρικού σήματος που σχετίζεται με τη συγκέντρωσή της. Οι συνηθισμένοι ανιχνευτές περιλαμβάνουν ανιχνευτή απορρόφησης ορατού υπεριώδους, ανιχνευτή φθορισμού και ηλεκτροχημικό ανιχνευτή. Η επιλογή του ανιχνευτή εξαρτάται από τα χαρακτηριστικά της προς ανάλυση ένωσης και τις απαιτήσεις ευαισθησίας ανίχνευσης.

Σύστημα Απόκτησης Δεδομένων: Το σύστημα απόκτησης δεδομένων χρησιμοποιείται για τη λήψη, καταγραφή και ανάλυση των σημάτων που εξάγονται από τον ανιχνευτή. Μπορεί να μετατρέψει το ανιχνευμένο σήμα σε παραμέτρους όπως η περιοχή αιχμής και ο χρόνος διατήρησης και να παρέχει ανάλυση και ερμηνεία των αποτελεσμάτων.

 

Αφού αφαιρεθεί ο διαλύτης απόπεριστροφικός εξατμιστής, το δείγμα που λαμβάνεται είναι συνήθως συμπυκνωμένο ή στερεό. Εάν θέλετε να αναλύσετε περαιτέρω ή να ανιχνεύσετε τις ενώσεις στο δείγμα, μπορείτε να τις αναλύσετε με υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης (HPLC).

Γενικά βήματα για την ανάλυση δειγμάτων μετά από περιστροφική εξάτμιση με HPLC

 

1. Διάλυση δείγματος: διαλύστε το δείγμα μετά από περιστροφική εξάτμιση σε κατάλληλο διαλύτη. Η διαλυτότητα της προς ανάλυση ουσίας και οι απαιτήσεις των συνθηκών ανάλυσης HPLC θα πρέπει να λαμβάνονται υπόψη κατά την επιλογή διαλυτών.

2. Παρασκευή πρότυπου διαλύματος: Εάν χρειάζεται ποσοτική ανάλυση, το πρότυπο διάλυμα της προς δοκιμή ένωσης μπορεί να παρασκευαστεί για επακόλουθη διόρθωση και υπολογισμό των αποτελεσμάτων της ανάλυσης.

3. Πραγματοποιήστε ανάλυση HPLC: εγχύστε το δείγμα σε σύστημα HPLC και ρυθμίστε την κατάλληλη στήλη διαχωρισμού, κινητή φάση και ανιχνευτή. Ανάλογα με το σκοπό της ανάλυσης, επιλέξτε τις κατάλληλες μεθόδους και παραμέτρους, όπως ο ρυθμός ροής, η θερμοκρασία και το πρόγραμμα κλίσης.

4. Συλλογή και ανάλυση δεδομένων: το χρωματογράφημα του δείγματος συλλέγεται με σύστημα HPLC και η ένωση στόχος ποσοτικοποιείται ή προσδιορίζεται σύμφωνα με την περιοχή αιχμής, το χρόνο κατακράτησης ή άλλες σχετικές παραμέτρους. Η τυπική μέθοδος καμπύλης και η μέθοδος εσωτερικού προτύπου μπορούν να χρησιμοποιηθούν για ποσοτική ανάλυση.

5. Ερμηνεία Αποτελεσμάτων: Σύμφωνα με τα αποτελέσματα της ανάλυσης, οι ενώσεις του δείγματος αξιολογήθηκαν ποιοτικά και ποσοτικά. Ανάλογα με τις ανάγκες, μπορείτε να δημιουργήσετε αναφορές ή να καταγράψετε αποτελέσματα ανάλυσης.

 

Η εφαρμογή του περιστροφικού εξατμιστήρα στην ανάλυση HPLC έχει δύο πρακτικές έννοιες

 

• Συγκέντρωση δείγματος: Σε ορισμένες περιπτώσεις, η συγκέντρωση του προς ανάλυση δείγματος μπορεί να είναι πολύ χαμηλή, επομένως ο χημικός περιστροφικός εξατμιστής μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη συμπύκνωση του δείγματος για την αύξηση της ευαισθησίας ανίχνευσης της αναλυόμενης ουσίας σε HPLC.
• Απομάκρυνση διαλύτη: Σε ορισμένα δείγματα, οι διαλύτες μπορεί να επηρεάσουν την ανάλυση HPLC, επομένως είναι απαραίτητο να αφαιρέσετε ή να αντικαταστήσετε τους διαλύτες στα δείγματα με διαλύτες κατάλληλους για HPLC. Ο εργαστηριακός περιστροφικός εξατμιστής μπορεί να βοηθήσει στην απομάκρυνση του διαλύτη και στη μετατροπή του δείγματος σε μορφή κατάλληλη για ανάλυση HPLC.

 

Ανάλυση HPLC καιπεριστροφικός εξατμιστήςείναι δύο κοινά χρησιμοποιούμενες τεχνικές στη χημική ανάλυση, και έχουν κάποιες διαφορές και συνδέσεις ως προς την αρχή και την εφαρμογή.

 

Διαφορά

 

Αρχή: Η HPLC βασίζεται στην αρχή της υγρής χρωματογραφίας και ο διαχωρισμός και η ποσοτική ανάλυση πραγματοποιούνται από την αλληλεπίδραση μεταξύ της στατικής φάσης (στήλη) και της κινητής φάσης (διαλύτης). Ο εξατμιστής χρησιμοποιεί την αρχή της θέρμανσης και της περιστροφής για να εξατμίσει γρήγορα το υγρό δείγμα και να αφαιρέσει τον διαλύτη, έτσι ώστε να συγκεντρωθεί το δείγμα ή να αλλάξει το περιβάλλον διαλύτη του δείγματος.

Πεδίο εφαρμογής: Η HPLC χρησιμοποιείται ευρέως στη χημεία, τη φαρμακευτική, το περιβάλλον και άλλους τομείς και μπορεί να χρησιμοποιηθεί για διαχωρισμό, ταυτοποίηση και ποσοτική ανάλυση ενώσεων σε σύνθετα μείγματα. Η περιστροφική εξάτμιση χρησιμοποιείται κυρίως στη διαδικασία συγκέντρωσης δείγματος, αφαίρεσης διαλύτη και προετοιμασίας δείγματος και χρησιμοποιείται συνήθως στην οργανική σύνθεση, την εκχύλιση φυσικών προϊόντων, την προετοιμασία δειγμάτων και άλλα πεδία.

Ταχύτητα ανάλυσης: Η ανάλυση HPLC συνήθως χρειάζεται πολύ χρόνο για τον διαχωρισμό και την ανίχνευση των δειγμάτων, κάτι που μπορεί να διαρκέσει αρκετά λεπτά έως αρκετές ώρες. Η μονάδα περιστροφικού εξατμιστή κενού μπορεί να εξατμίσει τα υγρά δείγματα γρήγορα σε σύντομο χρονικό διάστημα, συνήθως διαρκεί μόνο λίγα λεπτά.

 

Συνδέω-συωδεομαι

 

Δείγμα επεξεργασίας: Ο εξοπλισμός περιστροφικού εξατμιστή χρησιμοποιείται συχνά για τη συμπύκνωση δειγμάτων ή την αφαίρεση διαλυτών κατά την προετοιμασία του δείγματος για να γίνουν τα δείγματα κατάλληλα για περαιτέρω μεθόδους ανάλυσης, όπως η HPLC. Το αποτέλεσμα και η ακρίβεια της ανάλυσης HPLC μπορούν να βελτιωθούν με τη συμπύκνωση του δείγματος και την αφαίρεση του διαλύτη με περιστροφικό εξατμιστή.

Επιλογή διαλύτη: Στην ανάλυση HPLC, η επιλογή του διαλύτη είναι πολύ σημαντική για το αποτέλεσμα διαχωρισμού. οπεριστροφικός εξατμιστήςμπορεί να βοηθήσει στην απομάκρυνση του διαλύτη από το δείγμα και στη μετατροπή του δείγματος σε μορφή κατάλληλη για ανάλυση HPLC. Επομένως, ο περιστροφικός εξατμιστής μπορεί να παρέχει ικανοποιητικές συνθήκες διαλύτη για ανάλυση HPLC.

 

Παρέχουμε χειροκίνητο περιστροφικό εξατμιστή ανύψωσης και ηλεκτρικό περιστροφικό εξατμιστή ανύψωσης, επικοινωνήστε μαζί μαςsales@achievechem.comγια να προσαρμόσετε το δικό σας περιστροφικό μηχάνημα εξατμιστή.